1.TransIT?-VirusGEN?招式解析
TransIT?-VirusGEN? 依然采用Mirus專利多聚物轉(zhuǎn)染方法,無動物源成分,主要針對腺相關病毒(AAV)包裝而研發(fā),對部分慢病毒(Lentivirus)包裝系統(tǒng)也有很強優(yōu)勢,這兩種病毒都需要HEK 293細胞系生產(chǎn),所以該轉(zhuǎn)染試劑適用于包括懸浮和貼壁的各種類型HEK 293細胞系,能大幅提高轉(zhuǎn)染效率和病毒產(chǎn)量,從而在有限的時間和資源里實現(xiàn)收獲。
2.AAV包裝實戰(zhàn)分析
在相同培養(yǎng)條件下,用不同轉(zhuǎn)染試劑分別在懸浮的293-F和貼壁的293T/17兩種細胞系共轉(zhuǎn)pAAV-hrGFP, pAAV-RC, and pAAV-Helper三種質(zhì)粒包裝AAV重組病毒,然后利用GFP標簽在HT1080細胞上檢測AAV滴度。結(jié)果顯示,不論是懸浮還是貼壁293細胞系,采用TransIT?-VirusGEN?轉(zhuǎn)染產(chǎn)出的AAV滴度遠遠高于其他幾款轉(zhuǎn)染試劑。
3.慢病毒包裝實戰(zhàn)分析
在相同培養(yǎng)條件下,用不同轉(zhuǎn)染試劑分別在懸浮的293-F和貼壁的293T/17兩種細胞系轉(zhuǎn)染pLKO.1-puro-CMV-TurboGFP? 穿梭質(zhì)粒 和慢病毒包裝質(zhì)粒Mix powered(MISSION?)包裝Lentivirus重組病毒,然后利用GFP標簽在293T/17細胞上檢測Lentivirus滴度。結(jié)果顯示,不論是懸浮還是貼壁293細胞系,采用TransIT?-VirusGEN?轉(zhuǎn)染產(chǎn)出的重組慢病毒滴度都遠遠高于其他幾款轉(zhuǎn)染試劑。
4.轉(zhuǎn)染體系放大可提高AAV產(chǎn)量
采用TransIT?-VirusGEN?在6孔板和250mL培養(yǎng)瓶中轉(zhuǎn)染293-F懸浮細胞系包裝AAV,在6孔板和10cm平皿中轉(zhuǎn)染293T/17貼壁細胞系包裝AAV,兩組實驗在不同大小培養(yǎng)體系產(chǎn)出的重組病毒滴度比較結(jié)果顯示,當體系從6孔板→250mL培養(yǎng)瓶(或6孔板→10cm平皿)放大后,病毒產(chǎn)量也會相應提升20%左右,表明該轉(zhuǎn)染試劑適用于包裝重組病毒的工藝放大。
5、產(chǎn)品規(guī)格
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